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培養基的配制說明

更新時間:2018-10-09點擊次數:1205
  培養基的配制
  1.配料
  配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
  2.溶解
  淀粉溶解:少量冷水調成糊狀
  加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
  3.調PH
  用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。
  4.過濾
  濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)
  5.分裝
  一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
  (1)三角瓶
  若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
  (2)試管分裝
  液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;
  固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
  6.包扎
  分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。
  7.滅菌
  按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
  8.擺斜面
  滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。
  9.貯存
  培養基在30℃下放置,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

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