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關于渥曼青霉素的實驗研究
2018-08-17
目的:探討磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑渥曼青霉素(wortmannin)對足葉乙甙和阿霉素誘導的人胃癌細胞BGC823凋亡的影響。方法:常規(guī)培養(yǎng)人胃癌細胞BGC823,將細胞分為6組:①空白對照組(不加任何藥物);②渥曼青霉素組(終濃度為40nmol/L);③足葉乙甙組(終濃度為20μmol/L);④渥曼青霉素(終濃度為40nmol/L)+足葉乙甙組(終濃度為20μmol/L);⑤阿霉素組(終濃度為0.3μmol/L);⑥渥曼青霉素(終濃度為40nmol/L)+阿霉素...
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胰蛋白酶消化液的操作要點
2018-08-02
胰蛋白酶是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內的腸肽酶會活化該酶原，形成胰蛋白酶。它的特點是胰蛋白酶在小腸工作，它會將蛋白質水解為肽，進而分解為氨基酸，其適溫度約為37℃。另外已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原，這種過程即自動催化。胰蛋白酶消化液在操作過程中要注意以下幾點：1.本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被微生物污染；2.盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免失效；3.消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差；4.為了...
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藍白斑篩選及其原理介紹
2018-07-30
藍白斑篩選是重組子篩選的一種方法：是根據(jù)載體的遺傳特征篩選重組子，如α-互補、抗生素基因等。現(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個大腸桿菌的DNA的短區(qū)段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的調控序列和前146個氨基酸的編碼信息。在這個編碼區(qū)中插入了一個多克隆位點（MCS），它并不破壞讀框，但可使少數(shù)幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能，這種載體適用于可編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細胞。因此，宿主和質粒編碼的片段雖都沒有酶活性，但它們同時存在時，可形成具有酶學活...
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活性氧檢測試劑盒的操作步驟
2018-07-17
活性氧檢測試劑盒操作步驟：一、裝載探針：對于刺激時間較短（通常為2小時以內）的細胞，先裝載探針，后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。對于細胞刺激時間較長（通常為6小時以上）的細胞，先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞，后裝載探針。原位裝載探針：本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細胞。按照1∶1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10μmol/L。去除細胞培養(yǎng)液，加入適當體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細胞為宜，通常對于六孔板的一個孔加入稀...
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瑞氏-姬姆薩復合染液的使用說明
2018-07-02
瑞氏-姬姆薩復合染液可作為多種組織或細胞的染色使用，不同組織、細胞，不同的用途可以有不同的使用方法。1、取涂片、自然干燥。2、滴加瑞氏-姬姆薩染液2-3滴覆蓋整個標本涂片，染1-2分鐘。3、滴加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)，輕輕晃動玻片,與瑞氏-姬姆薩染色液充分混勻，染色3-5分鐘。4、水洗、吸干、鏡檢。5、染色后胞漿和胞核的染色清晰分明，細胞核著色呈深淺不同的紫紅色，胞漿呈淺紅色，胞漿中顆粒區(qū)分明顯。注意事項：1、涂片厚薄適宜，涂片干透后固定，否則細胞在染色...
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羥自由基清除能力測定試劑盒
2018-07-02
羥自由基清除能力測定試劑盒使用說明書產(chǎn)品說明：羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子，造成細胞結構和功能受損，進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。H2O2/Fe2+通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲-Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+，導致536nm吸光度下降，樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣品清除羥自由基的能力。操作步驟：一、樣品的制備：1.組織：按照...
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細胞自噬染色檢測試劑盒的使用方法
2018-06-29
細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)使用說明產(chǎn)品說明：自噬(autophagy)是細胞受到刺激后吞噬自身的細胞質或細胞器，終將吞食物在溶酶體內降解的過程，自噬體(autophagosome)為雙層膜包被的圓形或橢圓形結構，內含細胞質、長壽蛋白質和異常蛋白聚集物，損傷或多余細胞器如線粒體、粗面內質網(wǎng)和微體、病毒和細菌等。單丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一種熒光色素，是嗜酸性染色劑，通常被用于檢測自噬體形成的特異性標記染色劑，其檢測激發(fā)濾光片波長355nm...
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ECL Plus超敏發(fā)光液使用方法
2018-06-29
ECLPlus超敏發(fā)光液使用方法：1、常規(guī)電泳、轉膜、HRP標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標記IgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾心法。核酸雜交膜用HRP標記探針雜交，洗膜。2、在洗滌膜上的HRP標記二抗的同時，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之恢復室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有減低。3、用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥。將膜*浸入并與發(fā)光工作液充分接觸（約0.125ml...
標準品
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